各种修饰蛋白质组学技术原理 磷酸化 蛋白质磷酸化可以发生在多种氨基酸上,其中以丝氨酸 (S) 最多、苏氨酸 (T)次之、酪氨酸 (Y) 相对较少。利用金属氧化物TiO2对磷酸基团的亲和能力可以实现对含有S, T, Y磷酸化肽段的富集,利用高亲和力酪氨酸磷酸化基序抗体可以特异性富集酪氨酸磷酸化肽段。上述两种富集方式结合LC-MS/MS蛋白质定量的方法,实现大规模磷酸化蛋白质定性及定量分析。 N-糖基化 凝集素亲和法是目前糖蛋白质组学中最常用的分离富集方法。凝集素(lectin)是一类糖结合蛋白质,可与糖链可逆非共价结合,能专一识别某一特殊结构的单糖或聚糖中特定的糖基序列并与之结合。蛋白质经过酶解后利用凝集素(lectin)富集N-糖基化肽段,然后用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中切除连接在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。同时结合LC-MS/MS分析方法,实现大规模N-糖基化蛋白质定性及定量分析。
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