摆碟沉降菌不能正常检查怎么处理？

月照花影移 · 发表于 2014-7-16 15:02:18

关键是要排除空气中悬浮的抗生素微粒沉降在沉降碟中的干扰，所以如果采用沉降碟+滤膜法能否根本上排除干扰还值得考虑？

月下独酌 · 发表于 2014-7-16 15:03:28

有兄弟厂家的做法是在配制平皿的时候在里面加入头孢菌素酶，但头孢菌素酶易失活，验证是个问题。USP也说明需要加入能中和剂来中和抑菌物质。现在市售的有加入青霉素酶的胰酪胨大豆琼脂培养基沉降菌平皿和表面微生物碟，如MERCK，但价格较贵。

曲凋朱颜 · 发表于 2014-7-16 15:07:18

现在有专门针对抗生素干扰的培养基，添加有b-内酰胺酶的，可以分解抗生素，也有加青霉素酶的，不过b-内酰胺酶比青霉素酶适用范围更广。具体产品市场都有，楼主可以自己看看。我知道梅里埃有这个产品。估计价钱不菲。
至于添加中和剂的主要是针对排除消毒剂的干扰。

晨钟暮鼓 · 发表于 2014-7-16 15:08:25

取800ml营养琼脂培养基，加入200万单位的头孢菌素酶，倾注平板后取其做1-4号点的沉降菌后用于接种阳性对照菌，培养后于24 h计数。
   采样点编号    大肠埃希菌菌落数（4小时加酶）       大肠埃希菌菌落数（4小时不加酶）                                                                                                                               阳性对照
1.分装机北       0       台       110                                     0                                     262
2.分装机南       0       墙       93                                     0
3.前转盘       175       黄       3                                     0
4.加塞层流       151    温手套 31                                     0
上述实验是加头孢菌素酶和不加头孢菌素酶的实验结果，效果不是很好，加酶的平皿接种阳性菌种后，1，2两块平皿任然没有长菌，3，4与其阳性对照结果相比262个也几乎少了100个，不知道大家还有什么好的方法！？？？

是非转头空 · 发表于 2014-7-16 15:09:23

问题1：如果采用滤膜法的话容易受到法规的挑战，况且也没有那么大的滤膜........
问题2：再次强调的是动态连续监控，如果在生产前监控，能够代表什么呢？
建议1：在培养基中加入相应的中和剂，当然，具体的量和有效期应该使用纸片法测试抑菌环的方法来进行验证相应的效果；
建议2：做几个不锈钢筒将沉降菌的采样位置垫高，减少抑菌性粉尘的飞扬......

春愁待酒浇 · 发表于 2014-7-16 15:09:58

加消除酶是对的,不过动态监测是在每碟培养基干了前需更换新碟的，需且是四小时的累加计算结果的

星河舞动 · 发表于 2014-7-16 15:20:23

加入中和剂是正解，不过要做挑战性试验验证。

明灭楼台 · 发表于 2014-7-16 15:22:30

就做静态的呗

时光静好 · 发表于 2014-7-16 15:22:54

新版GMP讨论稿要求无菌区做动态监控，而且监控时间是4小时，只做静态显然不行，我们是冻干粉针，没碰到这个问题，不过听听大家的讨论很有意思。我将继续关注这个问题。

日月相耀 · 发表于 2014-7-16 15:23:52

冻干我公司也有，也了解过同行朋友的公司，即使有抗生素生产，也没做到这么细！希望大家再接再厉！